Единое окно доступа к образовательным ресурсам

Циклоферон. Клиническая фармакология и терапия: Руководство для врачей

Голосов: 2

В руководстве суммированы результаты многолетних исследований фармакологии и терапии отечественного индуктора интерферона - циклоферона (регистрационный № 95/211/5), обладающего широким спектром биологической активности. Представлены результаты экспериментальных и клинических исследований препарата, проведенных в ведущих научных и медицинских учреждениях РФ. Рассчитано на широкий круг врачей, фармацевтов, биологов, аспирантов и студентов медицинских вузов и всех интересующихся лекарственными средствами нового поколения.

Приведенный ниже текст получен путем автоматического извлечения из оригинального PDF-документа и предназначен для предварительного просмотра.
Изображения (картинки, формулы, графики) отсутствуют.
    по 10 мг; в виде мази в тюбиках по 10 г. Содержание полудана в лекарст-
венной форме не ниже 50 %.
   Полигуацил - высокомолекулярный индуктор интерферона, представ-
ляет собой комплекс полирибогуаниловой и полирибоцитидиловой кислот.
Выпускается в ампулах по 10 мг лиофилизированного порошка.
   Препарат индуцирует поздний интерферон, пик продукции (60-120
МЕ/мл) отмечается через 18-24 часа. В органах, богатых лимфоидной тка-
нью, максимум продукции ИФН отмечается через 48 часов.
   Преимущественно препарат индуцирует α-тип ИНФ. Гипореактивная
фаза начинает выявляться на 3 сутки после индукции и длится 5-6 дней,
после чего организм снова приобретает способность синтезировать ИНФ.
   Продигиозан - высокомолекулярный липополисахарид, выделенный из
Bact. prodigiosum. Выпускается в ампулах по 1 мл 0,005% раствора.
   Относится к группе бактерицидных препаратов с противовирусной ак-
тивностью и средством, стимулирующим специфические и неспецифичче-
ские факторы резистентности организма.
   Противопоказания: поражение ЦНС, коронарная недостаточность.
   Побочное действие: температурная реакция, ломота, боль в суставах,
мышцах, головная боль. Обострение хронических заболеваний кишечника.
   Ларифан - первый препарат из группы дс-РНК, обладающий интерфе-
роногенным действием, представляет собой двуспиральную РНК фага F2
Е.coli.
   Выпускается в ампулах по 10 мг лиофилизированного стерильного по-
рошка; в виде мази 0,05 % в тубах по 25 г.
   Препарат индуцирует α/β - тип ИФН, максимальное значение ИФН ре-
гистрируется в крови через 6-8 часов и достигает 60-120 МЕ/мл; через 24
часа - в сыворотке крови не определяется.
   Обладает выраженным иммунотропным действием: стимулирует спе-
цифические и неспецифические звенья иммунитета, а также выраженным
антибактериальным и антитуморогенным эффектом.
   Препарат не рекомендуется применять при заболеваниях почек.
   Ридостин - высокомолекулярный индуктор ИНФ природного проис-
хождения; дс-РНК, полученная из лизата киллерных дрожжей S. cervisine.
Выпускается в лиофилизированном виде в ампулах по 8 мг.
   Индуцирует в организме ранний α/β-интерферон. Максимум накопле-
ния в сосудистом русле отмечено через 6-8 часов и составляет 30-130
МЕ/мл. Не определяется в кровотоке через 24 часа.
   По действию препарат аналогичен ларифану.



                                                                     73


   Имунофан* - синтетический препарат, содержащий в качестве дейст-
вующего вещества гексапептид. Показана его иммуномодулирующая ак-
тивность, дезинтоксикационное и противовоспалительное действие. Пре-
парат снижает интенсивность пероксидации липидов, оказывает влияние
на выработку активных форм кислорода нейтрофилами периферической
крови, стимулирует продукцию противовирусных и антибактериальных
антител у больных острыми и хроничческими инфекциями.

               Индукторы интерферона (циклоферон и полудан)
           в терапии экспериментального герпетического кератита

    Появление нового высокоэффективного индуктора эндогенного интер-
ферона альфа/бета типа - циклоферона, производимого НТФФ “Полисан”,
закономерно поднимает вопрос о возможностях его использования в оф-
тальмологической практике, в частности в лечении вирусных заболеваний
глаз.
    Материалом для исследования послужили 13 здоровых кроликов -
альбиносов. У животных моделировали герпетический кератит путем на-
несения культуры вируса простого герпеса на предварительно надсечен-
ную роговицу левого глаза. Насечки (по две равной длины 2-2,5 мм) были
выполнены скарификатором по взаимно перпендикулярным плоскостям в
оптической зоне роговицы. В работе использовали вирус простого герпеса
1 типа штамма ЕС, выделенный от больной, страдающей рецидивирующим
herpes labialis. Особенностью этого штамма является способность вызывать
менингоэнцефалит при периферических путях заражения (Львов Н.Д.,
1989).
    Интактный правый глаз кроликов оставался контрольным.
    Все животные были разделены на три группы (соответственно по 5, 3 и
5 кроликов). Третья группа кроликов, не получавших лечения, являлась
контрольной.
    Все кролики находились под ежедневным врачебным наблюдением, а
на 4, 9, 11, 13, 16 и 23-й день эксперимента их осматривал врач-
офтальмолог. Офтальмологическое обследование включало осмотр глаз в
боковом (фокальном) освещении с использованием 0,1 % - раствора флюо-
ресцеина-натрия - известного витального диагностикума нарушения цело-
стности эпителия роговицы. При этом интенсивность прокрашивания ро-
говицы определяли по четырехбалльной шкале: 0 - отсутствие прокраши-
вания; 1 - едва заметное нестойкое прокрашивание; 2 - выраженное по-
верхностное прокрашивание инфильтрата; 3 - резко выраженное прокра-
*
    См.: Слепцова О.С. с соавт. // Офтальмологический журнал. 1997. №1. С. 5-8.

74


шивание воспалительного инфильтрата во всю толщу. Также по четырех-
балльной шкале измеряли и плотность васкуляризации роговицы: 0 - от-
сутствие врастания сосудов в прозрачные слои роговицы; 1 - врастание в
роговицу единичных сосудов; 2-вросшие в роговицу сосуды образуют
“венчик”, в котором дифференцируются отдельные сосуды; 3-вросшие со-
суды образуют сплошной красный “ореол” в прозрачных участках рогови-
цы.
    Аналогично описанным выше способом определяли и выраженность
острого иридоциклита: 0 - отсутствие его признаков; 1 - стушеванность ри-
сунка радужки; 2 - то же в сочетании с миозом; 3 - резко выраженное вос-
паление переднего отдела сосудистой оболочки глаза в сочетании с выпо-
том фибрина в переднюю камеру или образованием гипопиона. Оценку
воспалительных изменений конъюнктивы производили, ориентируясь на
следующие параметры: 0 - отсутствие воспалительных изменений; 1 - вос-
палительная инъекция сосудов конъюнктивы; 2 - то же в сочетании с вы-
раженной слизистым или слизисто-гнойным отделяемым из конъюнкти-
вальной полости; 3 - то же в сочетании с хемозом.
    На 4, 9, 14, 20 и 25-е сутки развития инфекции у животных брали мазки
с зараженного глаза и использовали для прямого вирусовыделения. Мате-
риал смыва разводили в 1 мл питательной среды, содержащей 1% сыворот-
ки крупного рогатого скота, 5 мкг/мл фугизона, 80 мкг/мл гентамицина и
готовили ряд разведений: от 10-1 до 10-4.
    Культуру клеток карциномы легкого человека А549 засевали в 96-
луночные планшеты по 100 мкл в лунку в концентрации 2Χ105 кл/мл и
культивировали при 370С в атмосфере 5% СО2 до образования монослоя.
    Клеточный монослой отмывали от ростовой среды раствором Хенкса и
в каждую лунку добавляли по 100 мкл соответствующих разведений ви-
русного инокулята, инкубировали 1 час при 370С в атмосфере 5 % СО2, за-
тем доводили объем до 200 мкл поддерживающей средой, содержащей 1 %
сыворотки крупного рогатого скота, 5 мкг/мл фунгизона, 80 мкг/мл гента-
мицина. На каждое разведение исследуемого материала отводилось по 4
лунки. Учет результатов проводился на 7 сутки по наличию специфическо-
го вирусного ЦПД, с определением титров вируса, вызывающих пораже-
ние клеток в культуре.
    Для выделения вируса из ткани мозга участок ствола мозга, изолиро-
ванного на 11 день после заражения, объемом 1 см3 был растерт в ступке и
разведен в 3 мл поддерживаемой среды. Материал был центрифугирован в
течение 30 мин при 6 000 об/мин, и из надосадка приготовлены серии раз-
ведений от 10-1 до 10-5.



                                                                       75


          Гистологическое и электронномикроскопическое
              исследование течения офтальмогерпеса

   Глазные яблоки животных, погибших в ходе опыта и выживших до
конца эксперимента, фиксировали в жидкости Буэна, обезвоживали и зали-
вали в парафин. Из приготовленных блоков готовили срезы толщиной 3-4
мкм окрашивали гематоксилином и эозином и анализировали под свето-
вым микроскопом. Морфологическому исследованию подвергали ком-
плексы, состоящие из роговицы, конъюнктивы, радужной оболочки и пе-
редних отделов сетчатки.
   Параллельные препараты готовили для исследования под электронным
микроскопом. Для этого участки роговицы фиксировали 2,5 % раствором
глутарового адельгида на какодилатном буфере с последующей дофикса-
цией четырехокисью осмия и контрастированием уранилацетатом, обезво-
живанием и заливкой в эпон. Ультратонкие срезы тканей контрастировали
цитратом свинца и исследовали под электронным микроскопом JEM-100S
при ускоряющем напряжении 80 кВ.

              Клиническое течение экспериментального
                     герпетического кератита

    У всех кроликов в зоне “инфицированных” насечек роговицы на третий
день эксперимента развился острый кератит, клинически выраженный в
виде герпетического древовидного (у 8 животных: 61,5%) или не имеюще-
го специфики округлого инфильтрата, достигающего 4-5 мм в диаметре
(38,5%). Во всех случаях роговичные изменения сопровождались выра-
женной воспалительной реакцией со стороны конъюнктивы (хемоз, сме-
шанная инъекция сосудов, слизистое отделяемое). Далее воспалительные
явления нарастали, формировался глубокий стромальный роговичный ин-
фильтрат, прокрашивающийся раствором флюоресцеина-натрия и дости-
гающий максимальной выраженности к 9-11 дню эксперимента. Одновре-
менно развивались и явления иридоциклита: миоз, отек радужки (у 2 кро-
ликов: 15,4%) и образование фибрина (и даже гипопиона) в передней ка-
мере. Следует отметить, что на 9-й день после заражения, у 6 животных
(46,2%) на фоне максимально выраженных воспалительных изменений
глазного яблока наступила генерализация герпетического процесса с раз-
витием менингоэнцефалита, приведшего к их гибели. У остальных же вы-
живших кроликов с 13-го дня заболевания наблюдалось постепенное
уменьшение явлений раздражения глазного яблока: стихание явлений
увеита, уменьшение хемоза, гиперемии конъюнктивы. Воспалительный
инфильтрат роговицы постепенно уменьшался в размерах, начиналась его

76


медленная эпителизация. В те же сроки на фоне уменьшения интенсивно-
сти смешанной инъекции сосудов глазного яблока наблюдали рост ново-
образованных сосудов среднего калибра в роговицу в виде плотного “час-
токола” по направлению от нижних отделов лимба в оптическую зону, к
воспалительному инфильтрату (у 6 кроликов: 85,7%). При этом вокруг ин-
фильтрата роговицы (преимущественно по его верхнему краю) неоваску-
ляризация роговицы была выражена максимально. В дальнейшем, начиная
с 18-го дня наблюдения, отмечали запустевание большинства новообразо-
ванных сосудов, проходящих через периферические отделы роговицы от
лимба к инфильтрату роговицы. При этом сохранялись лишь отдельные
крупные сосуды, а также сеть новообразованных капилляров непосредст-
венно у воспалительного инфильтрата роговицы. Завершался рассматри-
ваемый процесс полной эпителизацией роговицы с формированием неж-
ных субэпителиальных помутнений на месте воспалительного инфильтрата
и облитерацией всех новообразованных сосудов роговицы.
   Правый, контрольный глаз у всех животных на протяжении экспери-
мента оставался интактным.
   Клиническое течение экспериментального герпетического кератита
имело особенности в группах кроликов, на фоне лечения индукторами ин-
терферона.


                 Динамика герпетического кератита
                  в контрольной группе кроликов

    Полученные при обследовании животных результаты представлены в
таблице 40. Установлено, что размеры воспалительного инфильтрата рого-
вицы животных оказались максимальными на 9-й день наблюдения, однако
в рассматриваемой группе кроликов воспалительный инфильтрат имел все
же больший объем. С 11-го дня наблюдения размеры инфильтрата сущест-
венно уменьшились, обозначилась тенденция к его рассасыванию. Про-
крашивание инфильтрата, отмеченное с 4-го дня заболевания, оказалось
максимальным на 9-й день, однако уже на 11-й день эксперимента воспа-
лительный инфильтрат роговицы вовсе не прокрашивался. Следует также
отметить, что прокрашивание инфильтрата на 9-й день наблюдения в рас-
сматриваемой группе кроликов было более выраженным, чем в опытах.
    На фоне уменьшения размеров и “активности” воспалительного ин-
фильтра роговицы в контрольной группе кроликов также развилась его
васкуляризация. Однако у последних врастание в роговицу сосудов отме-
чено только с 13-го дня заболевания.


                                                                    77


   Воспалительные изменения конъюнктивы, выявленные с 4-го дня на-
блюдения, достигали максимума на 9-й день эксперимента, а затем, по ме-
ре рассасывания воспалительного инфильтрата роговицы, быстро умень-
шались. У одного кролика на 13-й день наблюдения отмечен интенсивный
фолликулез в сводах конъюнктивы обоих глаз (наиболее выраженной на
левом, зараженном), проследить динамику которого из-за скорой генерали-
зации инфекции и гибели животного не удалось. Признаки иридоциклита,
появившиеся и максимально выраженные на 9-й день заболевания, в даль-
нейшем имели тенденцию к уменьшению.




78


                                                                                      Таблица 40
     Динамика экспериментального герпетического кератита в контрольной группе кроликов (n=5)
             Контролированные параметры                           Время после моделирования кератита (сут.)
                                                              4          9       11      13       16                    23
Характеристика воспалительного инфильтрата роговицы:
  размеры (мм)                                            2,01±0,52 6,13±0,73        3,0        3,0          0           0
  диаметр прокрашивающихся участков (мм)                  1,76±0,63 5,13±0,76        0,0        0,0          0           0
  плотность васкуляризации (баллы)                            0         0            0,0        1,0          0           0
Характеристика воспалительной реакции окружающих
тканей глаза:
  выраженность иридоциклита (баллы)                           0     0,25±0,01         0,1       0,1         0            0
  выраженность воспаления конъюнктивы (баллы)             1,01±0,02 1,58±0,12         0,1       0,1         0            0
Развитие генерализации процесса (%)                           0         0            60,0        -         80,0          -
                                                                                                                  Таблица 41
       Динамика экспериментального герпетического кератита на фоне применения циклоферона (n=5)
                 Контрольные параметры                                Время после моделирования кератита (сут.)
                                                             4            9        11        13         16               23
Характеристика воспалительного инфильтрата роговицы:
   размеры (мм)                                           1,20±0,41   5,71±0,72   3,03±0,52   1,10±0,32   1,20±0,24   2,13±0,41
   диаметр прокрашивающихся участков (мм)                 1,22±0,33   5,70±0,73   3,03±0,52   1,10±0,32   1,20±0,24   2,13±0,41
   интенсивность прокрашивания (баллы)                    1,40±0,12   2,50±0,28   2,66±0,34   1,33±0,21   1,66±0,21   0,66±0,03
   плотность васкуляризации (баллы)                           0       0,50±0,06   2,01±0,32   3,03±0,43   2,03±0,32   1,00±0,23
Характеристика воспалительной реакции окружающих тканей
глаза:
   выраженность иридоциклита (баллы)                          0     0,27±0,05     0         0         0     0,20±0,03
   выраженность воспаления конъюнктивы (баллы)            0,93±0,02 1,42±0,23 1,55±0,24 0,44±0,06 1,11±0,34 0,33±0,05
Развитие генерализации процесса (%)                           0        40,0       -         -         -         -
                                                                                                                              79


   Следует отметить, что в рассматриваемой группе животных значитель-
но чаще, чем у кроликов, получавших препараты интерфероногенов, раз-
вивалась генерализация герпетической инфекции, возникал менингоэнце-
фалит с последующей гибелью животных (80,0%). При этом три кролика
погибли на 11-й день и один - на 16-й день эксперимента. Эти обстоятель-
ства не позволили достоверно оценить дальнейшую клиническую динами-
ку офтальмогерпеса у единственного выжившего “контрольного” живот-
ного.

                  Влияние циклоферона на течение
            экспериментального герпетического кератита

    Полученные результаты представлены в таблице 41. Установлено, что
воспалительный инфильтрат роговицы, достигший максимальной выра-
женности на 9-й день эксперимента, уже с 11-го дня (после трех инъекций
циклоферона) начал уменьшаться в размерах. При этом наиболее заметная
динамика наблюдалась в отношении прокрашивания инфильтрата: его
площадь на 11-й день заболевания уменьшилась в 5 раз, хотя интенсив-
ность прокрашивания деэпителизированных участков инфильтрата не-
сколько увеличилась. В дальнейшем с 13-го дня наблюдения (после четы-
рех инъекций исследуемого препарата) выявлено существенное уменьше-
ние размеров инфильтрата, а также площади и интенсивности его прокра-
шивания. Вместе с тем на 23-й день эксперимента увеличились размеры
воспалительного инфильтрата роговицы.
    Характеризуя неоваскуляризацию роговицы, следует отметить, что
наиболее информативным ее параметром является плотность (интенсив-
ность), которая прогрессивно нарастала с 9-го к 13-му дню заболевания, а
затем постепенно уменьшалась к 23-му дню эксперимента, в то же время
размер вросших в инфильтрат сосудов не изменялся.
    Воспалительная реакция со стороны конъюнктивы кроликов (хемоз,
инъекция сосудов), нарастала к 9-му и 11-му дню эксперимента, а затем
(табл. 41) достоверно уменьшалась к 23-му дню заболевания (после окон-
чания курса введения циклоферона). Причем на 16-й день эксперимента
(на фоне шести инъекций препарата) явления раздражения конъюнктивы,
как и интенсивность прокрашивания воспалительного инфильтрата рого-
вицы, усиливались, этому предшествовало увеличение размеров инфильт-
рата роговицы (описание выше). Признаки иридоциклита, появившиеся на
9-й день наблюдения, в рассматриваемой группе кроликов вскоре полно-
стью исчезли и возобновились лишь на 23-й день эксперимента.
    У двух кроликов, получивших по две подконъюнктивальных инъекции
циклоферона, на 7-й и 9-й дни эксперимента наблюдалась генерализация



80


герпетической инфекции с развитием острого менингоэнцефалита и после-
дующим летальным исходом.
                    Влияние полудана на течение
            экспериментального герпетического кератита

    Данные обследования 3 кроликов получавших подконъюнктивальные
инъекции полудана, представлены в таблице 42. Максимального размера
воспалительный инфильтрат роговицы достиг к 9-му дню заболевания, не-
значительно уменьшился на 11-й день, а затем наметилась отчетливая тен-
денция к его рассасыванию. При этом наибольшая площадь прокрашива-
ния инфильтрата роговицы отмечена на 11-й день эксперимента (после
трех инъекций полудана). Максимальная интенсивность прокрашивания
сохранялась до 16-го дня наблюдения. При этом величина инфильтрата ро-
говицы и интенсивность его прокрашивания к моменту завершения экспе-
римента была несколько меньше, чем у животных, получавших циклофе-
рон.
    Начало васкуляризации роговицы отмечено на 11-й день эксперимента.
Ее плотность, которая достигла максимума развития на 13-16-й день. И
лишь к 23-му дню заболевания отмечена тенденция к запустеванию сосу-
дов вокруг инфильтрата роговицы.
    Следует отметить, что незначительная воспалительная реакция со сто-
роны конъюнктивы, с максимальным развитием на 4-9-й дни эксперимен-
та, уже с 11-го дня наблюдения начала уменьшаться, а с 13-го дня была
полностью купирована. В то же время явление иридоциклита в этой группе
животных имело затяжное течение, сохраняясь и наблюдаясь до 16 дня за-
болевания.
    На 11-й день эксперимента (на фоне трех инъекций полудана) у одного
животного (33,3%) развилась генерализация герпетической инфекции с
развитием менингоэнцефалита и летальным исходом.

              Характеристика лечебной эффективности
                     используемых препаратов

    При сравнительном анализе влияния исследуемых препаратов на кли-
ническую динамику воспалительного инфильтрата роговицы установлено,
что хотя величина инфильтрата, площадь и интенсивность его прокраши-
вания и были на 9-й день эксперимента более выражены у кроликов, полу-
чавших циклоферон, в дальнейшем явления кератита у них имели более
благоприятное течение, чем на фоне лечения полуданом (табл. 43). Следу-
ет отметить, что максимальное развитие воспалительных явлений в рого-
вице у кроликов, получавших полудан, наступало позже (на 3 сутки), в
сравнении с первой группе животных. Как и васкуляризация воспалитель-

                                                                     81


ного инфильтрата роговицы, отмеченная в первой группе кроликов на 9-й,
а во второй - на 11-й день заболевания.




82



    
Яндекс цитирования Яндекс.Метрика